产品介绍
苏木素伊红(HE)染色液
产品简介：
苏木素(Hematoxylin)和伊红(Eosin)联合染色简称HE染色，是病理学常规制片中基本的染色方法，应用极其广泛。苏木 精是从原产中南美的洋苏木中提取出来的浅黄褐色的结晶，是一种碱性染色剂，它在被氧化后生成苏木素，同媒染剂(常用的是三价的铝或盐铁)一起使用，能够使细胞核染色。在病理诊断、教学和科研工作中，常用HE染色对正常组织和病变组织进行形态结构观察，可确定或鉴别病变组织、细胞中出现的某些异常物质与特殊成分，而需要采用的特殊染色方法、酶组织化学方法、免疫组织化学方法等也均是在观察HE染色组织切片的基础上进行的，在HE染色的组织切片中细胞核呈蓝色，细胞浆呈红色，二者形成鲜明的对比，易于观察分析。
Leagene苏木素伊红染色液中，苏木素染色液采用Leagene自主研发的配方，由进口的高纯度苏木 精、氧化剂等组成，不含氧化 汞、甲醇等有害物质，对细胞核染色效果好，其特点是不易产生沉淀和金属；应用范围广，可以用于人、动物、畜牧、水产等领域，可以用于组织石蜡切片、冰冻切片和组织细胞的染色等；苏木素染色液可以重复使用。
染色原理：
1、细胞核染色原理：
苏木素为碱性天 然染料，可使细胞核着色，细胞核内染色质的成分主要是DNA，在DNA双螺旋结构中两条核苷酸链上的磷酸基向外，使DNA双螺旋的外侧带负电荷，呈酸性，很容易与带正电荷的苏木素碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。苏木素在碱性溶液中呈蓝色，所以细胞核被染成蓝色。
2、细胞浆染色原理：
伊红是一种化学合成的酸性染料，在一 定条件下可使细胞浆着色，细胞浆的主要成分是蛋白质，为两性化合物，细胞浆的染色与染液的pH值密切相关，当染色液pH值在胞浆蛋白质等电点(4.7～5.0)以下时，胞浆蛋白质以碱式电离，则细胞浆带正电荷，就可被带负电荷的酸性染料染色。伊红在水中离解成带负电荷的阴离子，与胞浆蛋白质带正电荷的阳离子结合，使细胞浆着色，呈现红色。
3、分化作用：
染色后，用某些特定的溶液将组织过多结合的染色剂脱去，这个过程称为分化作用，所用的溶液称为分化液。在HE染色中常用0.5－1%盐酸乙醇作为分化液，因酸能破坏苏木素的醌型结构，使组织与色素分离而退色。大多数组织经苏木素染色后，必须用盐酸乙醇分化，使细胞核过多结合的苏木素染料和细胞浆吸附的苏木素染料脱去，再进行伊红染色，才能保证细胞核与细胞浆染色的分明。
4、返蓝作用：
分化之后，苏木素在酸性条件下处于红色离子状态，呈红色；在碱性条件下处于蓝色离子状态，呈蓝色。组织切片经酸性乙醇分化后呈红色或粉红色，立即用水除去组织切片上的酸而中止分化，再用弱碱性水使苏木素染上的细胞核呈现蓝色，这个过程称为返蓝作用或蓝化作用，另外用自来水(尤其是温水)浸洗也可使细胞核返蓝，但所需时间较长。
自备材料：
1、盐酸乙醇分化液
2、蓝化液，如稀氨水、碳酸 锂溶液等
3、系列乙醇
4、4%多聚甲醛
操作步骤(仅供参考)：
(一)石蜡切片染色
1、切片脱蜡至水
①二甲苯或浸蜡脱蜡透明液(Leagene DZ2011)作用2次，每次5～10min。
②(可选)无水乙醇作用2次，每次3～5min。
③95%乙醇 3～5min
④90%乙醇 3～5min
⑤80%乙醇 3～5min
⑥自来水或蒸馏水(亦可用30~40℃温水)冲洗 1～3min
2、染色
①Leagene苏木素染色液染色 5～8min
②自来水或蒸馏水冲洗 5～10s
③(可选)盐酸乙醇分化 2～5s
④自来水冲洗 20～30s
⑤蓝化液或温水返蓝 20～40s
⑥80%乙醇脱水 30～60s
⑦伊红染色液染色 3～5min
3、脱水、透明、封固
①80%乙醇 10～20s
②90%乙醇 10～20s
③95%乙醇作用2次，每次1～2min。
④无水乙醇作用2次，每次2～3min。
⑤二甲苯或浸蜡脱蜡透明液(Leagene DZ2011)透明3次，每次2～3min。
⑥中性树脂封片。
染色结果：细胞核呈蓝色；细胞质、肌纤维、胶原纤维、甲状腺胶质等呈深浅不一的红色；角蛋白、红细胞等呈明亮的橙红色。
(二)冰冻切片染色
1、乙 醚-乙醇混合固定液 5～10s
2、自来水冲洗 2～5s
3、Leagene苏木素染色液滴染1～2min(可加热至50℃)。
4、自来水冲洗 2～5s
5、(可选)盐酸乙醇分化 2～5s
6、自来水冲洗 2～5s
7、蓝化液或温水返蓝 2～5s
8、80%乙醇脱水 5～10s
9、伊红染色液染色 2～5s
10、80%乙醇 1～2s
11、95%乙醇 1～2s
12、无水乙醇 2～5s
13、苯酚二甲苯(1:3) 2～5s
14、二甲苯或浸蜡脱蜡透明液(Leagene DZ2011)透明3次，每次2～5s。
15、中性树脂封片。
备选方案：
1、无需脱蜡，直接迅速用蒸馏水冲洗2～3min.
2、染色、脱蜡、透明、封固步骤同石蜡切片的染色步骤。
染色结果：细胞核呈蓝色；细胞质、纤维呈红色。
(三)细胞染色
1、4%多聚甲醛固定10～20min。
2、自来水冲洗2次，每次2min。
3、蒸馏水冲洗2次，每次2min。
4、染色、脱蜡、透明、封固步骤同石蜡切片的染色步骤，作用时间应相应缩短。
染色结果：细胞核呈蓝色；细胞质、纤维呈红色。
注意事项：
1、切片脱蜡应尽量干净；系列乙醇应经常更换新液。
2、盐酸乙醇分化时间应根据切片厚薄、组织类别以及新旧而定，另外分化后自来水冲洗时间应该足够，以便彻底清洗酸。
3、乙 醚-乙醇混合固定液是由乙 醚和95%乙醇等量混合而得，再加入适量乙酸，密闭保存。
4、冷冻切片染色时间尽量要短。
5、蓝化液常使用0.2～1%氨水或Scott促蓝液或0.1～1%碳酸 锂溶液。
6、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期： 12个月有效。
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