DM0601 线虫染色液(多色蓝法)

病原线虫在病组织中可通过挑针直接挑取、漏斗分离或将病组织捣碎分离等方法取得活线虫虫体。为了识别常见线虫，对其形态和结构做一般性观察，可以用活体线虫制作临时玻片。为了进一步仔细观察、认识其分类学特征，需将活体线虫杀死和固定，有时还需染色，制成玻片标本。

线虫染色液(多色蓝法)

产品简介：

病原线虫在病组织中可通过挑针直接挑取、漏斗分离或将病组织捣碎分离等方法取得活线虫虫体。为了识别常见线虫，对其形态和结构做一般性观察，可以用活体线虫制作临时玻片。为了进一步仔细观察、认识其分类学特征，需将活体线虫杀死和固定，有时还需染色，制成玻片标本。

Leagene线虫染色液(多色蓝法)主要由次甲蓝、乙醇、甘油等组成，根据线虫在固定时体内各器官的氢离子浓度和生理状态不同，可区分线虫和植物组织，游离的线虫经过染色后内部器官染成不同颜色，便于观察识别。该染色液仅用于科研领域，不用于临床诊断或治疗。

产品组成：

自备材料：

1、 蒸馏水

2、 载玻片

3、 酒精灯

4、 显微镜

5、 水浴锅、恒温箱

操作步骤(仅供参考)：

1、 杀死：一般采用加热固定的方法，先在载玻片上滴加一滴蒸馏水，挑取一部分线虫在载玻片上，在酒精灯上加热5-6s，同时不断转动玻片，并随时在显微镜下观察。当线虫扭曲忽伸直时立即停止加热，否则会破坏线虫内部器官。亦可把线虫放入一滴水中，再加入0.5%热乙酸杀死线虫。也可以用0.1%碘液杀死线虫（线虫悬浮液与碘液等量混合，数秒钟即可杀死线虫） 。

2、 固定：采用TAF固定液或4%福尔马林固定液。

3、 (备选)脱水：将固定好的线虫置于盛有0.5ml线虫脱水剂Ⅰ的小玻皿中，将玻皿放在盛有过量95%乙醇的密闭容器中，放入35~40℃恒温箱内，孵育12h以上，玻皿内加入少量线虫脱水剂Ⅱ。然后将玻皿放在半密闭培养皿中，置于40℃恒温箱，待脱水剂中的乙醇完全蒸发后(一般需要2-3h)，将处理好的线虫置于无水甘油内，可长期保存。

4、 将经固定的线虫，直接移入3ml蒸馏水和3~5滴多色蓝染色液的离心管中，在55-60℃水浴加热染色3-5min。

5、 挑取数条线虫置于放大镜或显微镜下观察，如果已经均匀染成暗紫色，其内部器官几乎看不清楚，则染色程度已经足够；如果还有空隙或染色不均，则要继续延长染色时间。

6、 镜检：置于甘油中，加盖玻片观察。

染色结果：

注意事项：

1、 玻片应洁净，无油污。

2、 线虫的染色标本置于无水甘油中可保存2-5个月，之后会逐渐褪色。

3、 一般情况下，线虫被染成蓝紫色，但并不是所有特征都能染出来，即染色结果不一 定完全符合上述表格。

4、 固定时不宜用高热火焰固定。

5、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

有效期： 12个月有效。

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