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乳酸酚棉蓝染色法原理-北京供应好用的微生物

2023-06-05  来自: 北京雷根生物技术有限公司 浏览次数:47

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微生物染色的注意事项:

1、 待检菌菌龄应为18-24小时。一般情况下,革兰氏阴性菌的染色反应较为稳定,不易受菌龄的长短影响;而革兰氏阳性菌,有的在幼龄时呈阳性,超过24小时可变为阴性。故培养物越陈旧,菌细胞衰老、死亡,则染色常为阴性,造成错判。

2、 涂片以匀薄为佳,切不可浓厚。过于密集的菌体,因洗脱不匀常呈假阳性。镜检革兰氏染色反应时,要以分散开的细菌着色为准。涂片后不宜用火焰烤干,宜自然干燥;若经火焰固定时,应以不烫手为度,以免菌体受损,致使染色反应不准。

3、 革兰染色操作的关键步骤是对脱色的掌握,脱色时间不足,革兰氏阴性菌可染成阳性结果;脱色过度,革兰氏阳性菌会染成阴性结果。故应注意掌握,以无紫色脱出时立即水洗。脱色时间应根据涂沫厚薄、涂片含水量多少适当掌握,涂沫厚、涂片含水少(水洗后沥干水分)时,脱色时间稍长;涂沫薄、涂片含水量多(未沥干)时,脱色时间稍短,在20-30秒内调整。

4、 碘液配制后,应装在密闭的暗色瓶内储存。如因储存不当,部分碘将被挥发或被还原,碘液由原来的红棕色变为淡黄色,以至影响固定结晶紫的作用,故不宜再用。

5、 革兰氏染色能否获得满意的结果,与操作者的经验有很大关系。操作没有把握或对染液有怀疑时,应以对照菌同时染色。

微生物培养,是指借助人工配制的培养基和人为创造的培养条件(如培养温度等),使某些(种)微生物快速生长繁殖。微生物培养可分为纯培养和混合培养,前者是指对已纯化的单一菌种进行培养和利用;后者是指对混合菌种或自然样品(如土壤)中的微生物进行培养,然后根据培养基上所生长微生物的种类和数量,可在程度上估算土壤中微生物的多样性与数量。微生物培养需要用到培养基,根据微生物的不同种类和生活习性来配制特定的培养基。微生物培养成功的关键在于无菌操作,如果培养器具和培养基不能灭菌、培养的过程中有杂菌污染是很容易失败的。常用的微生物培养基可分为基础培养基、分离培养基、运送保存增菌培养基、生化试验培养基、药物敏感试验培养基、细菌L型培养基、真菌培养基、培养基、支原体衣原体和螺旋体培养基、病毒培养基等多种培养基。常用的培养基有LB培养基、SOB培养基、PDA培养基、沙保罗琼脂培养基、营养琼脂培养基、SM悬浮培养基、ADF培养基等。

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